ATCC細(xì)胞株溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應(yīng)動力學(xué)研究時，實(shí)驗(yàn)表明，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1～2小時，產(chǎn)物的生成可達(dá)。為加速反應(yīng)，可提高反應(yīng)的溫度，有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行，但不宜采用更高的溫度?？乖贵w反應(yīng)4℃更為*，在放射免疫測定中多使反應(yīng)在冰箱中過*，以形成zui多的沉淀。但因所需時間太長，在ELISA試劑盒中一般不予采用。

　　怎樣才能知道我購買的ATCC細(xì)胞株質(zhì)量怎么樣、是否為偽劣產(chǎn)品？現(xiàn)在市場上有很多利用偽劣細(xì)胞株坑害科研工作者，唯利是圖，直接無視科學(xué)研究的嚴(yán)謹(jǐn)性。那么我們要如何去判斷一個ATCC細(xì)胞株產(chǎn)品的質(zhì)量呢？下面一起來看看細(xì)胞株內(nèi)在質(zhì)量檢測方法大曝光！

　　*、利用干擾實(shí)驗(yàn)即可辨別ATCC細(xì)胞株是否檢測目的抗原具體方法如下：

　　1.將針對細(xì)胞株特異性的重組蛋白抗原和細(xì)胞株中的檢測抗體配置成antibody: antigen≈1:2的混合孵育液2.37℃孵育15分鐘后，ATCC細(xì)胞株代替原細(xì)胞株3.后續(xù)操作按照ATCC細(xì)胞株說明書進(jìn)行，加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物4.實(shí)驗(yàn)完畢后，檢測其標(biāo)準(zhǔn)曲線，如果標(biāo)準(zhǔn)曲線良好則說明加入的目的抗原和細(xì)胞株抗體不匹配，細(xì)胞株檢測抗體針對的是非目的抗原，ATCC細(xì)胞株該細(xì)胞株為偽劣假造細(xì)胞株。

　　5.如果標(biāo)準(zhǔn)曲線無線性，則說明細(xì)胞株檢測抗體已被目的抗原中和或干擾，影響了其實(shí)際細(xì)胞株抗體的檢測作用，則該細(xì)胞株檢測抗體針對的是目的抗原。

　　ATCC細(xì)胞株濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)定的溫度，特別是在氣溫較低的時候更應(yīng)如此。無論是水浴還是濕盒溫育，反應(yīng)板均不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應(yīng)，操作時的室溫應(yīng)嚴(yán)格限制在規(guī)定的范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)室溫溫度是指20～25℃，但具體操作時可根據(jù)說明書的要求控制溫育。ATCC細(xì)胞株室溫溫育時，只要平置于操作臺上即可。應(yīng)注意溫育的溫度和時間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。為保證這一點(diǎn)，一個人操作時，一次不宜多于兩塊板同時測定。

 

上一篇 : 腫瘤細(xì)胞現(xiàn)貨持續(xù)增殖的能力    下一篇 :  ATCC細(xì)胞冷凍保存是Z普遍的保存方法

>> 返回首頁